Методи за микроскопско испитување на микроорганизми

Видео: микробиологија. Подготовка фиксна препарати (E. Zvonaryova)

Cодржина

Видео: микробиологија. Подготовка фиксна препарати (e. zvonaryova)
светла поле микроскопија
Darkfield микроскоп
Фаза контраст микроскоп
флуоресцентна микроскопија
електронска микроскопија

Најмалата големина на микроорганизми се одговорни за користење на бактериите да се учат на морфологијата на прецизни оптички инструменти - микроскопи. Најчесто се користи светла поле микроскопија, темно поле микроскопија, фаза контраст и флуоресценција микроскопија. За посебните микробиолошки студии со користење на електронски микроскоп.

светла поле микроскопија

Светла поле микроскопија се врши со користење на конвенционален светлосен микроскоп, главниот дел од која е на објективот. На раб на леќи означува зголемување: 8, 10, 20, 40, 90.

Во студијата на микроби користи потопување систем (леќа). Потопување објективот е ангажиран во пад на кедар нафта, се применува на дрога. Cedar масло има истиот индекс на рефракција како стакло, а тоа се постигнува со најмалиот растера светлосните зраци (сл. 1.12).

Сл. 1.12. зраци на курсот во објективот на потопување

Сликата добиени преку објективот зголемува окуларот се состои од два објективи. Во домашни микроскоп за очите се користат со раст од 7, 10, 15 (Сл. 1.13). Вкупниот зголемување на микроскоп се утврдува од страна на производ на објективот за да се зголеми зголемување на окуларот. Во микробиологија обично се користи за да се зголеми во 900-1000 пати. Квалитетот на микроскоп не зависи од степенот на зголемување, но на негово решавање.

Сл. 1.13. Шема на комплексни светлосен микроскоп за набљудување во светли поле, прилагодени за осветлување Келер

Со ова ние мора да разберат најкраткото растојание помеѓу две точки е изготвување во која тие се јасно препознатливи под микроскоп. На резолуција на конвенционалните светлина микроскопи со потопување систем е 0,2 микрони.

darkfield микроскоп

Микроскопија во темно поле на гледање е врз основа на следниот принцип (сл. 1.14). Светол објект не е на дното, а на страна и да не падне во око на набљудувачот: видното поле останува темно, а објектот е осветлена на нејзината позадина. Ова се постигнува со посебен кондензаторот (параболоид) или конвенционален кондензаторот, опфатени во центарот на кругот на црна хартија.

Сл. 1.14. Возење микроскоп за набљудување во темна област.

Подготовките за darkfield микроскоп е подготвена од типот на "виси" и "скршен" капка. При подготовка на дрога "скршен" капка тест материјал (бактериска култура во физиолошки раствор) се нанесува на стаклена плочка, која е обложена со покривка стакло. Капка материјал го исполнува целиот простор меѓу капакот и слајд да се формира уште слој. За да се подготви "виси" капки неопходно да се користи специјално стакло слајдови со вдлабнатина во чаши центарот и капак.

Во средината на насловната стакло обложени материјалот за испитување. Рабовите на браздите на стакло слајд намачкани со вазелин, а тие се опфатени покритие стакло, така што падот беше против продлабочување центар. Потоа превртен подготовка покривно нагоре. Darkfield микроскопија се користат за изучување на живи организми unpainted.

Фаза контраст микроскоп

При донесувањето на зрак низ ахроматско објект само промени на флуктуации фаза на светлината бран кој не се смета од страна на човечкото око. Додека сликата е Спротивно на тоа, потребно е да се трансформира промена фазата во видлива светлина амплитуда на бранот. Ова се постигнува со фаза контраст кондензаторот леќа и фаза (Сл. 1.15).

Сл. 1.15. Шема фаза контраст микроскоп.

Фаза контраст кондензаторот е конвенционален објектив со револвер и сет од прстенест дијафрагми за секоја леќа. А леќа фаза има фаза плоча која се добива со примена ретки земјата сол на леќа. Сликата прстенест дијафрагма прстен се совпаѓа со фазата на соодветните цел плоча.

Фаза контраст микроскоп значително го подобрува контрастот на објектот, и се користи за проучување на мајчин јазик препарати.

флуоресцентна микроскопија

Флуоресценција микроскопија е врз основа на способноста на одредени супстанции под влијание на инцидентот светлина насмеан и свеж од брановата должина на други (обично е поголем) (флуоресцентна). Таквите супстанции се нарекуваат fluorochrome (acridine жолта, родамин, итн.) Објектно третираат fluorochrome од ултравиолетовата светлина добива светла боја во темно поле на гледање.

Главниот дел на микроскоп флуоресценција е рефлектор има ултравиолетови систем со филтер во боја на истото (Сл. 1.16) светилка и. Важно е да се користи не-флуоресцентни потопување во масло.
Флуоресцентна микроскопија се користи во практично микробиологија за означување и идентификација на инфективни агенси.

Сл. 1.16. Шематски приказ на микроскоп флуоресцентен: 1 - 2 лак lampa- - кварц колектор 3 - Cuvette исполнет со medi- сулфат 4 - преден kollektora- 5 - УВ филтер за да се 6 - 7 prizma- - плоча на ураниум stekla- 8 - окуларна филтер апсорбирање
ултравиолетови зраци.

електронска микроскопија

Карактеристики оптички микроскопи ограничени премногу голем брановата должина на видливата светлина (6000 A). Објекти кои се помали од оваа вредност се надвор од решавањето на светлосен микроскоп. Во електронски микроскоп, наместо на светлината бранови користење на електрони греди има исклучително краток бранова должина и висока резолуција (сл. 1.17).

Сл. 1.17. Шема пренос електронски микроскоп.

Како извор на електрони греди електрони пиштол користи, базата е волфрам жица загрева со електрична струја. Помеѓу волфрам и анодна во патот на електрони е електрично поле на висок напон. Електрони, зрак предизвикува сјајот на екранот со фосфоресцентна. Поминува низ објектот чии делови се со различни дебелини, електроните ќе биде соодветно одложен, со што ќе се манифестира на делови на екранот затемнување. Објектно стекнува контраст.

Формулации подготвени за електронска микроскопија на најдобрите колоиден филмови, беше испитуван по сушење објекти ( "мајчин лекови"), sputtering со помош на тешки метали, ultrathin делови на методот на реплика, и други.

Електронска микроскопија може да се открие најмалиот структура за да се добие зголемување од до 200 000 или видете објекти големина 0.002 микрони.

LV Тимошенко, МВ Chubik

Сподели на социјални мрежи:

Слични