Физиологија на микроорганизми: својствата култура на бактерии, изолација на чисти култури на микроорганизми

Културни добра бактерии

Cодржина

Културни добра бактерии
Изолација на чисти култури на микроорганизми

На културата (или macromorphological) својства вклучуваат карактеристики на микробен раст на цврсти и течни хранливи медиуми. На површината на цврсти медиуми хранливи материи, во зависност од културите, на микроорганизми може да расте како колонии, мозочен удар или континуирана тревникот.

Колонија наречена изолирана група на клетки на еден вид, порасна од една клетка (клон). Во зависност од тоа каде микроорганизмот е во пораст (на површината на цврсти хранливи медиуми или во нејзината подебели) разлика на површината, длабочината и на дното колонија.

Колонии расте на површината на медиумот, се различни: тие се специфични за видот и нивната студија се користи за да се утврди одреден додаток култура под студија.

Во опишувањето на колонии се земат предвид следниве карактеристики:
1) колонија форма - круг, amoeboid, rizoidnaya, неточни, итн;..

2) големината (дијаметар) колонии - многу мал (точка) (0,1-0,5 мм), мали (0,5-3 mm), со средна големина (3-5 mm) и големи (повеќе од 5 mm во дијаметар );

3) колонија површината - е мазна, груб, повлечен, збрчкана, со концентрични кругови или радијално избраздена;

4) колонии профил - рамен, конвексен, конусна, crateriform итн;..

5) транспарентност - досадна, мат, сјајна, проѕирна, прашкаст;

6) боја Колонијата (пигмент) - безбоен или пигментирани (бела, жолта, златна, црвена, црна), нагласи избор на пигмент во медиум со својата боја;

7) работ колонија - мазна, брановидна, назабени, реси, итн;..

8) колонија структура - хомогена, фино или Груб, struychataya- работ и структура колонија се определува со помош на лупа или микроскоп при ниски зголемување со поставување на Петри сад со сеење на фазата на микроскоп одредување на капакот;

9) ги утврдува конзистентност kolonii- допирање на јамка: колонија може да биде густа, мека, ingrowing во агар, мукозни (за телефонска линија се протега), кршливи (лесно да се скрши на контакт со јамка).

Длабокиот колонии често личат на повеќе или помалку зарамнет lenticels (образец ovals со остри краеви), понекогаш грутки од волна со влакнест додатоци во медиумот на културата. Формирањето на длабоко колонии често придружени со прекин на густа медиум, ако микроорганизмите изолирани со гас.

Крајна колонии обично се во форма на тенка проѕирна филмови, притаен по дното.

Карактеристики колонии може да варира со возраста, тие зависат од составот на среден и температурата на културата.

Растот на микроорганизми во течни медиуми во предвид, со користење на четири-седум дена култура се одгледува во стационарни услови.

Во течна медиумите за време на растот на микроорганизми е забележано заматеност на медиумот, формирање на филм или остаток.

Кога расте на полу (0,5-0,7% агар) хранливи материи медиуми мобилен микроби предизвика нагласена магла, уште форма растат само во текот на садење недоделкан во средата.

Често микробен раст е придружен со мирис пигментацијата средни диоксид. На карактеристичен мирис на некои култури на бактериски видови поврзани со формирање на различни естери (uksusnoetilovogo, uksusnoamilovogo et al.), Индол, mercaptan, водород сулфид, skatole, амонијак, маслен киселина.

Способноста да се формираат пигменти е вродено во многу видови на микроорганизми. Хемиската природа на пигменти различни: каротеноиди, антоцијани, melanins. Ако пигмент е нерастворлив во вода, обоено култура nalet- само ако тоа е растворлив, обоена и хранлива средина. Се верува дека пигментите заштита на бактерии од деструктивното дејство на сончевата светлина, така воздух колку пигментирани бактерии, покрај тоа, пигменти се вклучени во метаболизмот на овие микроорганизми.

Во природата, постојат т.н. фосфоресцентна бактерии култури кои светат во темница зеленикаво-сина или жолто светло. Таквите бактерии се наоѓаат главно во река или море. За луминисцентните бактерии - photobacteria -otnosyatsya аеробни бактерии (Vibrio, коки, прачки).

Изолација на чисти култури на микроорганизми

Чиста култура се нарекува култура која содржи микроорганизми видови. Изолација на чисти култури на бактерии -Required чекор на бактериолошки истражување во лабораторија, за истражување на различни микробиолошка контаминација на животната средина, а и воопшто за било која работа со микроорганизми.

На материјалот за испитување (водата, почвата, воздухот, храната или други предмети) обично содржи бактерии асоцијација.

Изолација на чиста култура ни овозможува да учат морфолошки, културни, биохемиски, антигенски и други функции, во согласност со целокупноста на кои се утврдува од страна на видови и типови на членството на патогенот, односно. Е. Произведени неговата идентификација.

За изолација на чисти култури на микроорганизми се користат техники кои можат да бидат поделени во неколку групи:
1. Метод Pasteur - сериски разредување на материјалот за испитување во течна хранлива средина на концентрација на една клетка во волумен (историско значење).

2. Методот од Koch ( "жици плоча") - сериски разредување на материјалот за испитување во агар стопена (температура 48-50 C), по што следи од страна на пополнување во петриев сад во која агар се стврднува. Закажувам марки, како по правило, на тројца или четворица минатата разредување каде бактериите станува ретка и во иднина, со раст од петриеви садови појави изолирани колонии се формираат од една од оригиналните мајка клетки. Од изолирани колонии во длабочината на агар се чисти култури на бактерии на свежо reseeding средина.

3. Метод за Shukevich - се користи за да се добие чист култури на Proteus и други микроорганизми кои имаат "притаен" раст. Закажувам тестот материјал за производство на кондензација на вода на дното на аранжман. Подвижни бактерии (Proteus) се во можност да одиме до аранжман култура, уште форми остануваат да расте на дното, на местото на инокулација. Subculturing горните рабови на култура, тоа е можно да се добие чиста култура.

4. Метод за Drigalski - широко се користи во бактериолошки практика, материјалот за испитување разредена во тест цевка со стерилен физиолошки раствор или супа. Една капка од првиот материјал е воведена во чаша со стерилен стакло шпатула и се шири во текот на површината на медиумот. Потоа, истите шпатула (не гори низ него во пламенот на горилникот) направи истата култура во вториот и третиот таблички.

Со секој инокулација на бактерии на шпатула е помалку и помалку, и галвански на третата чаша, бактерии ќе бидат дистрибуирани над површината на културата медиум одделно од едни на други. По 1-7 дена во инкубатор чување чаши (во зависност од стапката на раст на микроорганизми) во третиот чаша дава секоја бактерија клеточен клон изолирани формираат колонии кои subcultured на агар аранжман со цел да се акумулира чиста култура.

5. Метод за Weinberg. Особено потешкотии во распределбата на чисти култури на облигатни анаероби. Ако контакт со молекуларна кислород не предизвика непосредна смрт на клетките, култура произведени од страна на метод на Drygalski, но потоа веднаш се става во чаша Анаеробни. Сепак, повеќето од нив се метод размножување. Нејзината суштина лежи во фактот дека разредување на материјалот се спроведува во стопена и лади до 45-50 ° агар медиум.

Направете сериски разредувања од 6-10, а потоа на медиум во цевки е брзо ладење и истури површинскиот слој од мешавина на парафин и вазелин масло, со цел да се спречи навлегувањето на воздух во внатрешноста на медиумот на хранливи материи. Понекогаш културата медиум по сеење и мешање бил префрлен во стерилна цевка или капиларна Burri Пастер пипета, чии краеви се запечатени. Ако успешно одгледување на цевки, цевки Burri, Пастер пипета анаероби растат изолирани колонии. медиумите употреба култура, појасни дека изолирани колонии биле јасно видливи.

За да се извлече изолирани колонии анаероби цевка загрева малку тоа што ротира во пламен, со агар, во непосредна близина на ѕидовите, и на содржината на цевката се топи како агар колона се лизга во стерилен петриеви сад. Колоната на агар се сече со стерилна пинцети и извадете јамка колонија. Извлечена колонии биле сместени во течен медиум, поволни за развој на микроорганизми распределени. Агар медиум разнесени од цевка на Burri, кој поминува гас преку приклучок памук.

6. Методот на Hungate. Кога тие сакаат да добијат изолирани колонии на бактерии на особено висока чувствителност на кислород (строг аеробни) со помош на метод на ротирачки Hungate цевки. За оваа стопена агар медиум накалемени со бактерии во постојана струја низ цевка инертен гас ослободен од нечистотии на кислород. тогаш цевка беше затворена со гумена преграда и поставен хоризонтално во менгеме, ротирачки probirku- средата со рамномерно распоредени по должината на ѕидовите на цевката и тенок слој solidifies. Нанесување на тенок слој на цевка исполнета со мешавина гас овозможува да се добие изолирани колонии јасно видливи со голо око.

7. Изолација на еден клетки со користење на micromanipulator. Micromanipulator - уред кој им овозможува на микропипета или посебен mikropetli отстранување на една клетка од кашеста маса. Оваа операција е под контрола под микроскоп. На сцената на комората влажност микроскоп во собата во која лекот е ставен "виси капка". носителите работат стативи фиксната микропипета (mikropetli), движењето на кои во видното поле на микроскоп направени со микрон прецизност благодарение на системот на завртки и лостови на. Истражувач гледа во микроскоп, еден клетки micropipettes вади и ги пренесува во епрувети кои содржат стерилни течен медиум за да се добие клон на клетки.

LV Тимошенко, МВ Chubik

Сподели на социјални мрежи:

Слични