Основните принципи на цитогенетски пренатална дијагноза.

Во моментов, Проблемот цитогенетски дијагностика

Предности и недостатоци на цитогенетска анализа кога со користење на различни методи за добивање на хромозомски препарати од феталниот примероци на материјал се прикажани во Табела.

Се користи во повеќето центри комплекс цитогенетски и молекуларна цитогенетски дијагностички методи обезбедува најмногу комплетни информации за фетусот кариотип во различни фази на феталниот развој.

Видео: Цитогенетските студии. Биопсија на хорионски ресички пропушти абортус

Кога пренатална кариотипизацијата Тоа треба да бидат водени од принципите на анализа на хромозомите лекови меѓународно прифатените клинички цитогенетика и одобрени од страна на Министерството за здравство, како и правилата на меѓународната номенклатура опишувајќи carnotite.

Карактеристики цитогенетска анализа на клетките различни фетусот потекло амнионската течност клетки клетки AF се претставени од страна на неколку видови на различни потекло:
- клетки на амнионска мембрана (всушност амниоцити)
- феталниот епителни клетки (епидермисот, гастроинтестинални, генитоуринарниот и респираторниот тракт, оралната мукоза празнина).

Видео: Родител клуб (2015/11/25 - Дел 1)

Квалитативен и квантитативен состав AF клетки, и концентрацијата на активни клетки имаат индивидуални варијабилност и зависат од фазата на развој. Оптимално за цитогенетски истражување е амнионската епител - активно размножувањето клеточен клон специфични за одредена култура. Во меѓувреме прецизна идентификација на клетки способни за Митотичниот поделби и klonoobrazovaniyu во in vitro култура на клетки, многу тешко.

Најчесто за одгледување користени амнионска клетки добиени во период од 15-18 недели од бременоста. Употребата за оваа намена амниоцити порано (12-14 гестациска недела) или подоцна (по 20 недели од бременоста) услови е можно во принцип, но како по правило, во голема мера го отежнува и издолжува дијагностичкиот процес, се зголемува бројот на неуспешни обиди.

Стандардна култивирање на клетки на AF ги вклучува следните чекори: утврдување на културата, субкултура, хипотонија третман и фиксација. И покрај широката употреба на клеточни култури на AF во светот, заедничка техника за хромозомски подготовките се непостоечки. За култивирање на клетки AF користат два главни пристапи се разликуваат во методот за производство на колонии и методи фиксација.

Видео: една нова генерација на секвенционирање: принципи, можности и перспективи - Марија Logacheva

1. Колба-Метод-клеточна култура Пациентите во суспензија и фиксирање monolayer култура по trypsinization. На проба е изведена во два од три култури (10 метафазите по примерок). Ако сите метафаза плочи забележани исто кариотип, дијагнозата е воспоставена. Во случај на една метафаза со девијантно кариотип (структурни или нумерички) беше анализирана резервната третиот култура. Ако еден и ист хромозомски аберации се утврдува од страна на повеќе од една метафаза од едно шише, но не е потврдено и во другите шишиња, дијагноза "psevdomozaitsizm". Во случај на ист хромозомски абнормалности во повеќе од едно шише, дијагнозата е поставена "вистинска мозаицизам".

2. Методата in situ - одгледување и фиксирање на клетките на coverslips во петриеви садови или специјални шишиња - слајдови. Анализата е направена на метафаза плочи од три јадења култура (вкупно 10 анализирани колонии). При откривање на абнормални клон анализирани vsekultury. Хромозомски аберации забележани само во една чаша, покажува "psevdomozaitsizme", повеќе од еден - "вистински mozaigshzme".

стандарден процес култивирање амниоцити од денот на приемот на примерокот право кариотипизацијата трае во просек од 14-21 дена. Недостатоците се високата цена на културата супа и опрема, што е важно за домашни лаборатории, како и висока (2%), веројатноста за контаминација на примерокот мајката добиени клетки.

Во последниве години, таа се разви нов пристап кон хромозом анализа на култивирани клетки. «Pipett» Методот се базира на изолација mikromanipulyatsionnoy metafaznyhiprometafaznyhkletokiz на nesuspenzionnyh култури поради ihmorfologicheskim карактеристики и поради слабеењето на подлогата. Понатаму хипотонија третман и фиксација се изведуваат на еден клетки. Овој метод се намалува периодот култура да neskolkihdney и, најважно, го намалуваат ризикот од дијагностички грешки предизвикани од мозаицизам и контаминација на примерокот. Подготовка prometaphase и метафаза ознаки на овој начин може на било примарен и трансплантирани култури. За жал, скапа опрема и работна сила се спречи широкото прифаќање на овој прогресивен метод во клиничката пракса.