Превод на mRNA. Карактеристики на mRNA превод под синтеза на антителото

биолошката активност mRNA изолирани препарати

Cодржина

Видео: Емитување на процесот за пластични размена
Видео: Предавање 3. транскрипција, превод

оценува за нивната способност да се синтетизира во ќелија поврзани полипептидни ланци. Дефинирање на синтетички пептид специфична вредност во однос на сите новосинтетизираните, тоа исто така може да се утврди чистотата на подготовка на mRNA. Услов во овој случај е употребата на протеини означување не било на една амино киселини, но мешавини од најмалку 10 амино киселини и радиоактивни хемикалии методи за анализа со висока резолуција (на пример, две-димензионална пептид мапирање).

За преводот на mRNA Мобилен бесплатни системи користат три типа на Кребс асцит хепатом (Лебедово ЕА, 1972- Шехтер, 1973 ..). зајак на ретикулоцити (Stavnezer, Хуанг, 1971- Mach e. a., 1973- Cowan e. a., 1976) и пченица садници (Шехтер, Burstein, 1976- Storb, Марвин, 1976). На најзгодно, очигледно, е последниот систем. На принос на означени претходник во него е 0.1 pmol или 2,6 ng на 0,007 единици воведе A2vo mRNA (Шехтер, Burstein, 1976).

Бидејќи во оваа фаза предизвик што е опишано истражување е да се учат на потенцијалните translational способноста на mRNA, и мобилни бесплатен систем за растителни и животински во принцип се однесуваат на овој ист (Шехтер, Burstein, 1976), степенот на соодветноста и предности на систем очигледно зависи од следниве три параметри: големина на ендогени протеини синтеза (долниот подобро), достапност и едноставност на потребните состојки и износот на mRNA која мора да се направени во систем за добивање сигурен истрага фузиски протеин.

Видео: Емитување на процесот за пластични размена

аналог систем ќелија бесплатни понекогаш служат како жаба ооцити. Тоа е покажано (Смит e. A., 1973) дека воведувањето во ооцити на синџири на mRNA кодирање на имуноглобулин., Доведе до синтеза на овие синџири. Овој метод, сепак, е посложена и бара значителни износи на mRNA.

Видео: Предавање 3. транскрипција, превод

повеќето експерименти врши од страна на mRNA емитува со кои кодираат синтезата на L-синџир (L-mRNA), бидејќи нивното одвојување е многу полесно отколку изолација на mRNA кодирање за синтеза на H-синџири (H-mRNA). Учење превод на производи од mRNA шифрира миелом имуноглобулини на L-синџирот доведе до неочекуван резултат. Се покажа дека mRNA во системи мобилен бесплатни кодираат полипептиди синтеза (претходник) поголеми во големина од зрели L-синџир. Формирање на првиот висока производ под дејство на 41 клетки 13s mRNA plasmacytomas MOPC што е опишано Свон et al (Swan, Е, 1972 година.), Под дејство на 10-14S mRNA од клетките plasmacytomas MOPC 21 -. Milstein et al (Milstein и f,. 1972). Молекулската тежина на резултантниот производ беше поголема од молекуларна тежина од соодветните L-синџири (1500), од кој што беше констатирано тоа, што содржи 15 дополнителни амино киселински остатоци.

како кога се додава на слободен систем ќелија 355-формил-tRNA како единствен извор тагови 355-метионил откриени во висока компонента, беше утврдено дека барем дел од овие додатни амино киселини се наоѓа на NH2-koitse молекула L-ланец (во еукариоти синтеза на полипептидни синџири почнува со вклучување метионин) . Подоцна синтеза претходник податоци беа потврдени во експериментите со mRNA "кодирање синтеза XL-синџири MOPC 70E (Toncgawa, Baldi, 1973), РЕК" (Storb, Марвин, 1976), MOPC 41 (Mach ea, 1973), MOPC 321 ( Шехтер, Burstein, 1976), MOPC 63 (Шехтер e. a., 1976) и L-синџири MOPC 104E (Burstein e. a., 1976).

Сподели на социјални мрежи:

Слични