Стабилизација на имуноглобулини хаптени. Зависноста на конформација на антителото на температурата

Постојат податоци од различни методи, покажувајќи да се зголеми стабилноста на антитела и нивните Fab-фрагменти кои произлегуваат од усложнување со хаптени. На пример, додавање на овие зголемува стабилноста на хаптен молекули да denatiruyuschemu акција на гванидин хидрохлорид (Cathou, Вернер, 1970) и на дејството на химотрипсин (Grossberg д. A., 1965).

IgM антитела исто така, се стабилизира специфични хаптени во однос на протеолиза со субтилизин и химотрипсин (Ashman, Мецгер, 1971). Тоа се покажа дека намалувањето на чувствителноста на напад од страна протеази IgM во целост се должи на промена на својствата Fab-фрагменти. Според нашиот модел, го смени рамнотежата хаптен компонента А и Б-Fab фрагмент лево.

Затоа, за да се објасни гафови доволно за да се овозможи на горенаведените резултати дека бесплатна енергија е повеќе компактен conformer Пониска бесплатна енергија conformer Б (т. е. A-conformer стабилна од Б). Ако е така, тогаш зголемувањето на протеини стабилност не треба да зависи од тоа како соодветните рамнотежа промена предизвика.

Всушност, тоа се покажа дека промената А баланс лево спин-етикета димери на лесни ланци, симулирање на структурата на Fab-субединици од страна на дејството на 1,2 M NaCl и 0.75 M (NH4) aS04 зголемува нивната стабилност во однос на температура. А слична промена во рамнотежата меѓу А и Б conformers предизвикува други од аспект на структурата на протеинот и нејзината хидратација школка агенси, како што се натриум додецилсулфат и температура.

зависноста конформациона државата IgG температурата откриен од други методи. На пример, G. Troitskii и соработници (1971) и Ј F. Kiryuhin и соработници (1972) од страна на оптички ротационо дисперзија забележано реверзибилна рН-зависна конформациона промени транзиција температура од 27 ° до 38 °. Потоа се покажа дека во неутрална pH вредност од транзиција температура не зависи од изоелектричната точка на ИгГ.

Меѓутоа, кога pH, далеку од изоелектричната точка кога молекула IgG станува доволно голем сопствена задолжен, температурата конформациона транзиции се целосно отсутни (Troitsky д. a., 1973). Во VP Zavyalova и персоналот (Zavyalov д. A., 1975) спроведена повеќеслојна структура на протеини истражување миелом како функција на рН и температурата со ротационо дисперзија оптички, кружни dichroism спектроскопија вознемирувачки, електрохемиски iodination и калориметрија на диференцијално скенирање.

Откриено е дека кога pH вредноста е изменета 6,0-6,5 Расположливоста chromophoric групи се намалува растворувач. Ова може да се должи на промени во бројот на обвинети групи во протеини и намалување умолекуларните електростатско сили на одбивање. А слична појава - заштитен дел тирозин и триптофан остатоци (pH 7,35- 0,01 M фосфатен пуфер) -nablyudali со зголемување на температурата од 25 до 35 ° C. Ова се случува за време на врзувањето на хаптен dinitrophenyl хомологни зајак антитела (IgG).

Овие резултати може да се смета како индикација за тоа дека зголемувањето на температурата и формирање на одредени комплекси со хаптени зголемува нивната компактност, што е во согласност со голем број на дела наведени погоре.