На талог имуни комплекси. Интеракција домени на синџири антитело

состојба агрегација на имуни комплекси не треба да се меша со фиксација Fc-фрагмент на комплементот компонента, а со тоа и нивните дифузија во талогот. Истражувањето на структурата на одредена талог антитела со антигени се врши со помош на спин етикети (Grigoryan et al., 1969). За означување на протеини користење nitroxyl радикални синтетизира врз основа на малеимид. Се ковалентно реагираат со SH-групи зајак антитела по редукција со 2-меркаптоетанол interchain дисулфид обврзници. Кога била сочувана оваа активност антитела.

Како резултат на тоа, врнежи спин-етикетирани антитела овалбуминот етикета продолжи да се вртат без доживува стерни пречка. Од друга страна, не се специфични таложење на спин-етикетирани антитела со амониум сулфат резултираше со силна имобилизација тагови. Овие податоци укажуваат на мрежа, лабава структура на талог формиран имуни комплекси.

Во експериментите користење метод кружни dichroism разлики беа пронајдени во спектарот на три хомологни antipnevmokokkovyh антитела пред и по нивната интеракција со специфични лиганди-geksasaharidny (Jaton д. a., 1975a). Ние ги проучувал промени во спектарот на хомологни recombinants и хибридни H- и L-синџири од дејството на хаптен. Хомологена рекомбинантен антитела имаа спектар идентичен со спектарот на мајчин антитело, и покрај отсуството на interchain S-S-врски.

Промени во спектарот се јавуваат за време на врзувањето на хаптен во сите три на мајчин антитела, Fab-фрагменти и хомологни рекомбинантен молекули. Сепак, не постои доказ за конформациона промени врз интеракцијата на хаптен со getsrologichnymi рекомбинантни антитела. Овие резултати се потврдени од страна на промена во флуоресценција квантната принос на антитела. Тие укажуваат на висока специфичност на interchain интеракции во имуноглобулини.

уникатен информации интеракција домен во синџири може да се добие со етикета спин. Оваа информација зависи од нејзината протеини обврзувачки сајт. соодветните амино киселински остаток (или остатоци) на која е им се случува на етикетата се определува со својата хемиска структура и означување услови (на пример, на рН). Во нашата работа (Kaivarainen, Nezlin, 1967a) протеини означени со две iminoxyl радикали: 2,2,6,6-тетраметил-4-амино- (N-dichlorotriazine) - R, и imidozolidom (2,2,5,5-тетраметил -1-oksilpirollin-4-карбоксилна киселина) - R2. Во зависност од условите на ознаки за пристапување би можеле да комуницираат со лизин или хистидин.

На EPR спектар на етикети R, и R2 конјугиран веројатно за тоа дали списанија остатоците на протеини се состои од три тесни линии карактеристика на слабо immobizirovannoy тагови без доживува Steri-преобразува попречена од макромолекули. Во контраст, овие SPECTRA EPR спектарот на имуноглобулин G, означени од страна R, (се претпоставува пристапување хистидин остатоци) се состои од пет компоненти.
како спектри укажува на способноста на етикетата за да биде во две различни микросредина - А и Б, кои се разликуваат во microviscosity.

Сличноста на ИПР спектри IgG и разни субединици се очигледно предизвикана заеднички за сите овие структурни елементи, имено, домени, и нивната интеракција. Оваа претпоставка е потврдена од страна на фактот дека протеолиза на изолирани домени L-синџирот на A-компонента на спектарот што одговара на етикетата на имобилизирани, целосно да исчезне. Тоа е важно да се напомене дека според физичко-хемиските и имунохемиски методи половина L-синџири (домени) да ги задржат своите основни просторната структура својствени за нив во составот на непроменети L-синџири.

Во експериментите на интеракција спин-етикетирани Рт хистидин остатоци на антителата со антигените изолирани користење на зајак анти-човечкиот хемоглобин антитело, IgG анти-говеда и магарето анти-хуман LgG. Според нашите експериментални етикети спин се главно поврзани со Fab-фрагменти. На шемата на промени на ИПР спектарот на спин-етикета антитела од страна на реакција со антигени не зависи од тоа дали или не формира талог.

Во сите случаи студирал, усложнување спин-етикета антитела со антигените резултира со зголемување сооднос на областа на A-компонента за да се подрачјето на централна компонента во однос на контрола на спектарот на ESR. Исто така, имаше A-компонента промена соодветно зголемување имобилизација етикети во една држава. Од областа на А-компонента се утврдува од страна на износот на етикетата во оваа држава, нејзината зголемена значи зголемување на износот на етикетата во една држава или зголемување на живот на оваа држава.