Дијагноза на стероидни хормони. методи

Видео: Современи методи на дијагностика и лекување на болести на црниот дроб

Точно да се измери мали концентрации на стероидни хормони и нивните метаболити метод имуно користење компетитивна инхибиција имунопреципитација или радиоимуноесеј (РИА), која за првпат бил опишан од страна Berson и Yalow во 1960 година .. Сепак, понатамошниот развој на оваа техника научници се соочуваат со некои тешкотии. Прво, стероиди, неимуноген, и имаат слична структура - циклопентан-хаптен јадро со мали варијации, што го прави тешко за производство на специфични антитела.

стероиди Може да се направи имуногени, да им се приклучи хаптен носечки протеин, и може да го зголеми нивото на антителата пред-имунизација на хаптени. Сепак стероид дел, на која е во спрега протеин има значително влијание врз специфичност на антитела произведени. Така, антитела генерирани за време на конјугација говедски серумски албумин во позиција 19 изложбата повисока специфичност во споредба со одредбите на 3 или 17. За попрецизно толкување на клинички потребно да се има податоци за вкрстена-реактивност на секоја антитела избрани за оваа анализа.
повеќе фирми - изработка на реагенси обезбедат податоци за нивните вкрстена реактивност на антитела, но тие не се секогаш сигурни и треба да бидат проверени дека лабораторија, која ќе изврши анализа.

Второ, висок афинитет за врзување протеини, пронајдени во серумот, како што се SHBG, се натпреваруваат со антитела и на тој начин се создаде бучава за определување на бројот на молекули на стероид од страна на РИА. Ова доведува до потешкотии за директно мерење и бара пред екстракција на стероиди со органски растворувачи и често хроматографски поделба. Во исто време, некои хемикалии, како што се 8-anilinonaftalensulfonat, се способни за инхибирање на врзувачки протеини стероид, што овозможува да се измери концентрацијата на стероид директно, без претходна екстракција.

Видео: Модерна безопасни методи за дијагностицирање на нозете и 'рбетот ortopedicheskoym центар "Јулијана"

директна анализа Таа ги зема малку време и може да биде автоматизирано. Во комерцијално достапни автоматизирани делови за одредување на концентрацијата на естроген, прогестерон и тестостерон, што се користат во многу лаборатории. Таквите анализи, сепак, се карактеризира со ниска чувствителност, како и за утврдување на минимална концентрација - ниска сигурност. Во овој поглед, не се препорачува за употреба во определувањето на многу мали концентрации на хормони, како естрадиол кај деца и мажи (<100 пг/мл), тестостерона у детей и женщин (<1,5 нг/мл) [64] и прогестерона во время стимуляции яичников (<1 нг/ мл).

проблем може да се реши со вадење серум хексан (волуменски однос 3: 2) проследено со својата сушење и намалување на серумски bessteroidnoy, кои потоа се подложува на анализа на автоматски единица.

апликација гасна хроматографија во комбинација со масена спектрометрија (GC / MS) совладува многу од недостатоците на имуно и се смета за посигурен и прецизен метод. Сепак, GC / MS се врши во неколку чекори, вклучувајќи растворувач за екстракција, хроматографски поделба и хемиски толкување кои му претходат инструментална анализа, и чувствителноста на GC / MS често е пониска од онаа на некои видови имуно. Неодамна, оваа техника е заменета со течна хроматографија во комбинација со тандем со масена спектрометрија (LC / TMS), се карактеризира со повисока осетливост и перформанси, како во споредба со GC / MS.

Сега, оваа нова технологија се смета за репер. LC / TMS беше искористена за истовремено мерење на естрадиол и естрон нивоа во крвта на човекот плазма без вкрстена реактивност. Овие техники може да се препорача како референца и се користи за стандардизација и имуно одобрување студии кои ги обезбеди потребните клинички потреби за едноставност и висока продуктивност.