Главните пристапи за пренатална дијагноза на генетски болести. Директен дијагноза на генетски аномалии.

Методи за молекуларна дијагностика - главен производ и примарна алатка за анализа на структурата, т.е. на секвенца на нуклеотиди во молекулата на ДНК - геном база (наследна апарат) лице. Првата фаза од големата меѓународна дешифрирањето на молекуларната структура на ДНК програмата за истражување на човековите беше завршена во 2000 година, создавајќи "нацрт на човечкиот геном." Во овој дел ќе се ограничи на конципирањето на основните принципи на ДНК-базирани методи. Подетално со техниката на молекуларни студии може да се најде во посебни монографии и учебници.

дијагностички методи ДНК-базирани, насочена кон идентификување на мутации или молекуларна мутант хромозом означување е полимераза верижна реакција на синтеза на ДНК (PCR). Историски порано метод Јужна размачкана хибридизација во моментов се користи многу поретко, иако се користи за идентификација на одредени мутации, особено динамичен мутации ", што доведува до ширење на болеста (кревка-X синдром, miotonicheskayadistrofiya, Хантингтоновата хореа, голем број на невродегенеративни заболувања) и хемофилија а, и некои други болести.

Методот на PCR е предложен во 1983 година од страна на американскиот научник Кари Mullis доделени за ова откритие Нобеловата награда во 1993 година, методи за синтетизирање овозможува селективно (засилена) ин витро релативно мал ДНК сегменти и со должина од неколку десетици до неколку kilobases, користи како шаблон ДНК од било содржи засилена секвенца.

потребно услов за PCR е знаење од нуклеотидната секвенца од зајакнатата DNA регион, како специфичен избор на страницата е извршено со хибридизација на ДНК дефиниција со две вештачки синтетизирани прајмер - ДНК олигонуклеотид секвенци, обично од 15 до 30 bp комплементарни 3`-терминалите на засилена дел на смисла и антисенс нишки од ДНК, соодветно. На растојанието помеѓу прајмери ​​кој се одредува должината на синтетизираниот молекули. Детали за техника продукции на PCR може да се најде во прирачниците.

PCR метод Тој стана главен во молекуларна дијагностика на генетски болести. Развиена и широко се користи во пракса, различни варијанти на овој метод за брзо и ефикасно да се идентификуваат мутации, студија на ДНК полиморфизми се користи за молекуларна означување на мутант хромозоми.

Во моментов, постојат два основни пристапи за пренатална дијагностика, како и генерално, да се дијагностицирање на генетски болести:
- директна дијагноза врз основа на непосредна идентификација на мутации во одредена ген;
- индиректно (индиректни) дијагностика, која е базирана на означување на мутираниот ген (понекогаш се нарекува ознака "пациент" хромозом носи мутираниот ген) со помош на молекуларни маркери.

Директен дијагноза на генетски аномалии

Преку директни дијагноза Идентификација на мутации во генот. Предности на метод - висока (се приближува до 100%) дијагностичка точност, можноста за ПД и информативни анализа (соодветност за молекуларна дијагностика) семејства и идентификување хетерозиготна носачи во отсуство на детето пациентот.

на нема големи генетски мутации Се бара детално молекуларна анализа (скенирање) примарната структура на генот за откривање на мутации што може да се припише на недостатоци на методот.

Основата на секое моногенски болести се повреди на ген функции, предизвикани од различни мутации во својата семантичка делови, односно, ген секвенца кодирање за синтеза на протеини (cDNA). видот и мутација спектар кој, како и нивните фенотипска експресија (сериозноста на болеста) се специфични за секој ген и се одредува во најголем дел од уникатните карактеристики на својата примарна структура (нуклеотидна секвенца).

Исто така е познато дека зачестеноста на различни мутации во секој ген е различен. Има чести "виша" мутации, дијагностичка вредност, која е особено висока, и "мали" (еден спорадични), за регистрирање на исклучително ретки. За многу од гените одговорни за наследни болести, спектарот на мутација се добро проучени и се развива оптимални алгоритми за нивна идентификација. На пример, позитивен за ген за цистична фиброза е delF508 мутација, која се наоѓа во речиси 50% од сите мутант хромозоми кај пациенти CF во Русија за ген фенилаланин - тоа R408W мутација откриени Y45% од пациентите со фенилкетонурија во Русија, за ген дистрофин се карактеризира со доволно голем бришења, евидентирани во 60% од X хромозоми кај пациенти со мускулна дистрофија на Душен, итн

повеќе детали Алгоритми за молекуларна дијагностика различни моногенски болести се дадени во посебни упатства, препораки.