Adamts13

Така, во нормални услови на оваа протеаза се прилепува фактор мултимери на фон Вилебранд и создава нормално и со мала молекуларна тежина.

Недостаток на ADAMTS13 игра важна улога во патогенезата на тромботична тромбоцитопенична пурпура (синдром Moshkovitsa), со оглед на неуспехот на овој металопротеиназното големи мултимери на vWF се одговорни за неконтролирано формирање на тромбоцитите микроагрегатите, блокирање на микроциркулацијата. Во последниве години, намалување на ADAMTS13 не е само резултат на микроангиопатија синдроми, но исто така и во хроничен гломерулонефритис, сепса, цироза на црниот дроб, ДИК, и многу повеќе.

принципот на методот

Начело на метод (ELISA) врз основа на врзувањето на молекули ADAMTS13 антитело на површината на микроплоча на специфични. По отстранување на супстанции кои не се врзани за микроплоча, инкубирани со ензим-етикета антитела (конјугирана). Како резултат на тоа, на површината на микроплоча се јавува пристапување антитела означени со ензим комплекси на постоечка анти-антитело ген. Додадено после миење 3,3`, 5,5`-тетра-metilbenzidin да се оцени ензимската активност карактеристика боење тест смеса. интензитетот на бојата е пропорционална на ензимската активност и соодветно на тоа, бројот на ADAMTS13 во примерокот.

Видео: ТТП ADAMTS13

Реагенси и опрема

• Микроплоча бунари обложени со антитела на ADAMTS13.
• Пример пуфер.
• Мие пуфер.
• A раствор на chromogen / супстрат (chromogen - tetramethylbenzidine, подлогата - атом на водород пероксид).
• Стоп за решение.
• Опремата за вршење ELISA (мијалник, читач за таблети и др.).

Дистрибутер дијагностички комплет на реагенси - ЗАО "BIOHIMMAK".

Примероци на крв за учење, како примерок за определување на концентрацијата на ADAMTS13 BTP употреба на стабилизира натриум цитрат целата крв.

техника перформанси

Редоследот на активностите лабораторија лекар во одредувањето на нивото на ADAMTS13 треба строго да се следат инструкциите на сет на реагенси. Калибратори препорачува да се истражуваат во дупликат дефиниции.

Видео: ADAMTS13 Teil 1

резултатите од евалуацијата на студија за да се утврди е потребно концентрацијата на ADAMTS13 да се конструира калибрациона крива. На кривата на калибрација постават апсорпцијата вредност добиена со мерење на примероци за калибрација. Потоа, на меѓусебно поврзани точка се врши калибрациона крива за определување на концентрацијата на ADAMTS13 ( «точка-до-точка"). Нормално, концентрацијата на ADAMTS13 е 50-140%.

Толкување на ADAMTS13 резултатите на студијата - металопротеиназа раскинува von Willebrand фактор. Ниска концентрација и / или намалена ADAMTS13 активност идиопатска причина тромботична тромбоцитопенична пурпура (синдром на Moshkovitsa). Moshkovitsa синдром се карактеризира со пет големи клинички манифестации: невролошки пореметувања, дисфункција на бубрезите, хемолитична анемија, тромбоцитопенија, треска. Болеста е тешко, без патогенетски третмани базирани на стапката на смртност достигнува 90%. На синдром Moshkovitsa често покажуваат намалување на ADAMTS13 концентрација помалку од 10%. Сепак многу повеќе корисни за дијагностицирање на оваа патологија е одредување на ADAMTS13 активност, како во овој случај, освен за квантитативно намалување на оваа забрана може да се открие металопротеиназното автоантитела.

Мутации на генот контролирање на синтеза на ADAMTS13, може да се утврди чести рецидиви тромботична тромбоцитопенична пурпура. Клиничката манифестација на синдромот наследен ADAMTS13 дефицит нарекува Upshaw-Schulman (Upshaw-Schulman). Во ова ниво синдром ADAMTS13 е помалку од 6,7%.

Во времето на пишување монографии, за жал, не се дефинирани јасно разликување карактеристики тромботична тромбоцитопенична пурпура и хемолитична уремичен синдром. Сепак, повеќето експерти имаат тенденција да се верува дека хемолитички-уремичен синдром не е забележано намалување ADAMTS13, па оваа бројка е многу значајно за диференцијалната дијагноза на овие опасни по живот услови.

Причините за грешки

• Доколку температурата складирање на владата реагенс.
• прекршочна постапка за перење (во случај на рачно перење да се мијат најмалку 4 пати).
• Мешање на реагенси од различни места.
• Кондензација на влага во рамките на бунари (за да се спречи појавата на кондензација не треба да биде отворена до пакетот, додека таа се загрева до собна температура).

Други аналитички технологија додавање на реагенси за мерење на концентрацијата на ADAMTS13 постои метод за одредување на активноста на металопротеиназата. Недостиг на активност предизвикана од мутација или присуство на антитела против ADAMTS13.